443143416貨號(hào)：A102-5
規(guī)格：250rxn/40μl;500rxn/20μl（1.0 ml×5支）
保存：-20℃避光保存兩年
【產(chǎn)品概述】
本產(chǎn)品主要成份是通過基因工程技術(shù)改造的DNA聚合酶，核心組分包含Taq酶、dNTPs、Mg2+、PCR反應(yīng)緩沖液和PCR反應(yīng)穩(wěn)定劑等，可以有效抑制非特異性擴(kuò)增，顯著提高擴(kuò)增效率，從而對(duì)靶基因進(jìn)行快速和準(zhǔn)確擴(kuò)增。本產(chǎn)品為2×預(yù)混試劑，使用時(shí)只需加入模板、引物和水，使其工作濃度為1×，即可進(jìn)行反應(yīng)。具有快速簡(jiǎn)便、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)，可最大限度的減少人為誤差。-20℃保存時(shí)，有時(shí)會(huì)形成沉淀，溶解后混勻不會(huì)影響使用效果。
【適用范圍】
適用于常規(guī)PCR快速擴(kuò)增檢測(cè)（可以直接用菌液做模板進(jìn)行PCR反應(yīng)），PCR產(chǎn)物3’末端突出一個(gè)堿基A，純化后的PCR產(chǎn)物可用于T/A克隆。建議擴(kuò)增產(chǎn)物片段長(zhǎng)度≤4kb。
【推薦qPCR體系（以40 μl反應(yīng)體系為例）】
| Component | Volume | Final ?Concentration |
| 2×Taq Advanced PCR Master Mix | 20 μl | 1× |
| 10 μM Forward Primer | 1 μl | 0.25 μM |
| 10 μM Reverse Primer | 1 μl | 0.25 μM |
| PCR-grade Water | Variable | – |
| Template | Variable | As Required |
| Total Volume | 40 μl | – |
可根據(jù)以下原則進(jìn)行調(diào)整反應(yīng)體系：反應(yīng)體系中引物終濃度為0.25μM即可得到較好的擴(kuò)增效果。當(dāng)反應(yīng)性能較差時(shí)，引物終濃度可以在0.1-0.5 μM范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)整。PCR靈敏度極高，推薦將模板稀釋后加入反應(yīng)體系中，如模板為未稀釋質(zhì)粒原液，使用體積不應(yīng)超過qPCR反應(yīng)總體積的1/20。
【PCR反應(yīng)條件】
| Step | Temperature | Duration | Cycles |
| Enzyme activation | 94℃ | 3 min | 1 |
| Initial Denaturation | 94℃ | 3 min | 1 |
| Denaturation | 94℃ | 30 sec | 40 |
| Annealing | 50℃ | 40 sec | |
| Extension | 72℃ | 40 sec/kb | |
| Extension | 72℃ | 5 min | 1 |
結(jié)果檢測(cè)：PCR反應(yīng)結(jié)束后，取5μl反應(yīng)產(chǎn)物，直接上樣進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳。
【備注】
本產(chǎn)品僅供科研使用。在確認(rèn)產(chǎn)品質(zhì)量出現(xiàn)問題時(shí)，本公司承諾為客戶免費(fèi)更換等量的合格產(chǎn)品。 在所有情況下，本公司對(duì)此產(chǎn)品所承擔(dān)的責(zé)任，僅限于此產(chǎn)品的價(jià)值本身。